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猪Th1/Th2型细胞因子重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 温立斌 1 ; 何孔旺 2 ; 杨汉春 3 ; 郭容利 2 ; 李成仁 3 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

3.中国农业大学动物医学院

关键词: Th1/Th2型细胞因子;外周血单个核细胞;重组质粒;实时荧光定量PCR

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2009 年 24 卷 S1 期

页码: 11-14

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 依据GenBank登录的猪Th1型细胞因子(IL-2、IL-12、IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞中扩增和克隆了上述因子的101 bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系列稀释后作为标准模板,通过实时荧光定量PCR方法,建立了它们各自的标准曲线及直线回归方程。结果表明,该方法具有线性关系好,特异性、敏感性、重复性高等特点,为猪体内IL-2、IL-12I、FN-γ、IL-4、IL-6和IL-10的mRNA水平的定量检测,提供了必要的技术手段。

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