文献类型： 中文期刊

作者： 华再东 ¹ ; 郑新民 ¹ ; 魏庆信 ¹ ; 肖红卫 ¹ ; 刘西梅 ¹ ; 华文君 ¹ ; 郭帅 ² ; 张立苹 ¹ ; 毕延震 ¹ ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院

2.武汉金鹰牧业有限公司

关键词： 梅山猪;克隆猪;核移植;猪胎儿成纤维细胞

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2014 年 41 卷 10 期

页码： 199-204

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究以中国优良地方品种梅山猪为材料,采用胰酶消化法获得猪胎儿成纤维细胞,通过使用Y染色体SRY基因引物SRY-1、SRY-2进行PCR扩增,结果发现,雄性胎儿样本能扩增出250bp的Y染色体特异性基因片段,而雌性胎儿样本未扩增出此条带;G1、G2、G3、G4和G5代的融合效率差异不显著(P>0.05),但G5代作为供体细胞核移植的重组胚胎卵裂率显著高于G1、G2、G3和G4代(P<0.05);使用G5代的胎儿成纤维细胞作为供核细胞,通过手术移植的方法,将重构胚胎移植到二元后备母猪体内,结果成功地获得了体细胞克隆梅山仔猪,并且仔猪全部为雄性胎儿,说明该性别鉴定方法不但操作简单,而且准确度高;经微卫星DNA多态性鉴定,确定克隆猪来自供核细胞,与代孕母猪无亲缘关系。本研究将为中国优质猪品种改良、保种、性别控制及建立人类疾病模型等研究提供有效可行的方法,为批量生产克隆优秀种猪提供了坚实的理论基础。