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猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 马红艳 1 ; 蒋智勇 2 ; 孙丽华 1 ; 郝永清 1 ; 宋长绪 2 ;

作者机构： 1.内蒙古农业大学动物科学与医学学院

2.广东省农业科学院兽医研究所

关键词： PCV1ORF1;克隆;表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2007 年 37 卷 08 期

页码： 666-669

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%。将ORF1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-ORF1。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,PCV1ORF1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku。

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