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猪传染性胃肠炎病毒纯化方法的选择与优化

文献类型: 中文期刊

作者: 蒋凤英 1 ; 邹勇 1 ; 何锡忠 1 ; 李春华 1 ; 张春玲 1 ; 王英 1 ; 许宝华 2 ;

作者机构: 1.上海市农业科学院

2.南昌大学

关键词: 猪传染性胃肠炎病毒;纯化;超速离心;饱和硫酸铵;聚乙二醇-6000

期刊名称: 江西农业学报

ISSN: 1001-8581

年卷期: 2010 年 22 卷 08 期

页码: 129-131

摘要: 利用超速离心、饱和硫酸铵、聚乙二醇-6000(PEG-6000)对猪传染性胃肠炎细胞毒进行纯化,收集纯化病毒测定蛋白含量,分别运用PCR方法和作为ELISA包被抗原方法对纯化的效果进行检测,并对最佳纯化方法进行优化。3种纯化方法获得的蛋白浓度分别为1.875、6.435、0.763 mg/mL。PCR检测结果显示PEG-6000纯化后在上清液中未检出病毒,其余2种上清中均检出病毒。3种纯化方法制备的包被抗原ELISA试验阴阳性比值(P/N)分别为2.21、1.27、2.25,最终选择PEG-6000作为纯化病毒的方法,其最佳优化参数为PEG-6000浓度8%、浓缩时间2 h、NaCl浓度1%。研究表明利用PEG-6000纯化TGEV是一种经济实用、操作简单、并有较高纯化效率的方法,纯化后的TGEV为后续建立特异、敏感、快速的ELISA检测方法奠定了良好基础。

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