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利用cDNA-SRAP分离结球甘蓝抗黑腐病相关基因的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张云霞 1 ; 宋立晓 2 ; 曾爱松 2 ; 高兵 2 ; 严继勇 2 ;

作者机构： 1.南京农业大学

2.江苏省农业科学院

关键词： 甘蓝;黑腐病;cDNA-SRAP

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2014 年 29 卷 05 期

页码： 32-35

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了挖掘抗病基因,探寻甘蓝抗黑腐病机制,选取抗性材料C7,在幼苗4~5片真叶期,喷施菌液浓度为1.0×108cfu/mL的细菌悬浮液,喷施蒸馏水作对照,提取接种后1,3,5 d的总RNA进行等量混合,获得2种不同处理的样品池。采用SRAP分子标记技术进行基因差异表达分析,结果显示:60对SRAP引物组合共扩增出大小在100~750 bp的685条带,平均每对引物扩增11条带,共检测到24个多克隆位点。回收测序后,将得到的9条差异表达片段TDFs(Transcript derived fragments)进行克隆和序列分析,其中3条差异基因片段未搜索到任何同源蛋白,其余6个基因均按功能分类,可分为涉及能量代谢、植物细胞壁蛋白相关基因、液泡加工酶基因和未知功能基因。表明cDNASRAP方法简单、重复性好、试验成本低,完全适用于差异表达分析,从中获得一些与甘蓝抗黑腐病相关的差异基因片段,可用于甘蓝抗黑腐病的分子机理研究。

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