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胡椒CBF1基因克隆与表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 伍宝朵 1 ; 胡丽松 1 ; 范睿 1 ; 杨建峰 1 ; 郝朝运 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院香料饮料研究所;农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室;海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室

关键词： 热引1号胡椒;石南藤;低温胁迫;CBF1基因

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2018 年 10 期

页码： 2010-2015

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆胡椒CBF1 (C-repeat-binding factor 1)基因,在低温耐受种质石南藤和低温敏感种质热引1号胡椒中,分析其组织表达模式和低温胁迫前后表达量差异,为胡椒抗寒分子机制研究提供基础。【方法】以胡椒组织总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增CBF1基因ORF,采用生物信息学软件分析CBF1基因编码蛋白特性和结构域,利用荧光定量PCR方法分析该基因的组织表达模式和低温胁迫条件下表达情况。【结果】在热引1号胡椒(低温敏感)和石南藤(低温耐受)中克隆出CBF1基因,分别命名为PnCBF1和PwCBF1。在2份种质中,该基因开放读码框长度分别为660和654 bp,预测蛋白质分子量分别为24.07和23.87kD,等电点PI为4.82。实时荧光定量PCR分析结果表明CBF1基因在石南藤的根组织中高量表达; CBF1基因在热引1号胡椒和石南藤中受低温诱导表达,且表达模式不同,低温胁迫各时期,CBF1基因石南藤的表达量都极显著高于热引1号胡椒。【结论】克隆获得PnCBF1和PwCBF1,其在热引1号胡椒和石南藤中都受低温诱导表达,在低温耐受种质石南藤中的表达量极显著高于低温敏感种质热引1号胡椒,且表达模式不同。本研究中胡椒CBF1基因的克隆和表达分析为胡椒CBF/DREB1低温调控途径研究和抗寒分子机制研究奠定了基础。

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