文献类型： 中文期刊

作者： 向旭 ¹ ; 邓占鳌 ² ; 郑启发 ² ; 陈存贤 ² ; Frederick G.Gmitter Jr ² ;

作者机构： 1.广东省农业科学院果树研究所

2.广东省农业科学院果树研究所;美国佛罗里达大学海岸研究与教育中心;美国佛罗里达大学柑桔研究与教育中心

关键词： 柑桔;线虫;抗性基因;分子标记;遗传作图柑桔;线虫;抗性基因;分子标记;遗传作图

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2009 年 7 卷 03 期

页码： 497-504

收录情况： CSCD

摘要： 本文利用先期从BAC文库获得的NBS-LRR类候选抗病基因克隆序列Pt8a和Pt9a,进一步开发与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1连锁的分子标记。以Pt8a和Pt9a序列作探针,通过高密度克隆印迹杂交,从BAC文库筛选出200个以上的阳性克隆,以阳性克隆插入序列设计引物,对柑桔抗线虫材料和感线虫材料开展以PCR扩增为基础的集群分离分析,发现一部分克隆序列与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1紧密连锁;再通过染色体步行测序,分别从3个克隆(7A4,4L17和29F20)获得3个完整的NBS-LRR类候选抗病基因序列。从此类序列开发更高特异性的分子标记,并在利用原有分子标记的基础上,对柑桔线虫抗性杂交后代群体(9145family)构建较高密度的遗传图谱;同时,将新开发的分子标记应用于柑桔衰退病抗性杂交后代群体(9401family),以初步估算柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1与柑桔衰退病抗性基因Ctv的遗传距离。本文利用先期从BAC文库获得的NBS-LRR类候选抗病基因克隆序列Pt8a和Pt9a,进一步开发与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1连锁的分子标记。以Pt8a和Pt9a序列作探针,通过高密度克隆印迹杂交,从BAC文库筛选出200个以上的阳性克隆,以阳性克隆插入序列设计引物,对柑桔抗线虫材料和感线虫材料开展以PCR扩增为基础的集群分离分析,发现一部分克隆序列与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1紧密连锁;再通过染色体步行测序,分别从3个克隆(7A4,4L17和29F20)获得3个完整的NBS-LRR类候选抗病基因序列。从此类序列开发更高特异性的分子标记,并在利用原有分子标记的基础上,对柑桔线虫抗性杂交后代群体(9145family)构建较高密度的遗传图谱;同时,将新开发的分子标记应用于柑桔衰退病抗性杂交后代群体(9401family),以初步估算柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1与柑桔衰退病抗性基因Ctv的遗传距离。