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大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 余波 1 ; 王芳 2 ; 康超 2 ; 李永霞 2 ; 周思旋 1 ;

作者机构: 1.贵州省畜牧兽医研究所

2.贵州省生物研究所

关键词: 大鲵虹彩病毒;MCP基因;原核表达;免疫原性

期刊名称: 淡水渔业

ISSN: 1000-6907

年卷期: 2017 年 47 卷 02 期

页码: 18-22

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据Gen Bank中大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白MCP(major capsid protein,MCP)基因序列(序列号:KF512820),设计一对特异性引物,以大鲵虹彩病毒贵州分离株基因组DNA为模板,PCR扩增大鲵虹彩病毒MCP基因并测序,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因进行比对,然后将其亚克隆到原核表达载体p ET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后进行Western blot分析。结果显示:PCR扩增出长度为1 392 bp的片段,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因核苷酸序列相似性为99.7%~99.9%,SDSPAGE电泳显示该重组蛋白的相对分子质量约为67×103。免疫原性检测结果表明,该重组蛋白可与兔抗大鲵虹彩病毒阳性血清特异性反应,具有免疫原性。

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