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灰盖鬼伞漆酶在毕赤酵母中表达及条件优化

文献类型： 中文期刊

作者： 裴佐蒂 1 ; 彭日荷 2 ; 田永生 2 ; 赵伟 2 ; 姚泉洪 2 ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.上海市农业科学院生物技术研究所

关键词： 漆酶;毕赤酵母;灰盖鬼伞;表达优化

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2014 年 30 卷 04 期

页码： 6-9

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据灰盖鬼伞漆酶基因LCC1的蛋白序列和毕赤酵母的密码子偏爱性设计并合成CCLCC1I基因片段,将其连接到经过改造的pPIC9K质粒上构建分泌表达载体pYN2395;构建好的载体经BglⅡ酶切线性化后电激转化到毕赤酵母GS115中,通过ABTS底物显色反应筛选获得阳性转化子。从培养基、发酵温度、铜离子浓度和甲醇添加量等方面对重组酵母的发酵条件进行了研究。结果显示:添加0.6%的丙氨酸能极大地提高灰盖鬼伞漆酶的表达量,并确定最终优化组合为:培养基使用MMA,发酵温度为20℃,铜离子体积浓度为0.5mmol/L,甲醇添加量为1.0%/24 h。

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