文献类型： 中文期刊

作者： 杜金梁 ¹ ; 曹丽萍 ¹ ; 贾睿 ¹ ; 王涛 ² ; 顾郑琰 ² ; 张春云 ² ; 骆仁军 ² ; 徐跑 ¹ ; 殷国俊 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

2.南京农业大学无锡渔业学院

关键词： 建鲤;肝细胞脂肪变性;油酸

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2017 年 38 卷 02 期

页码： 107-113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过对油酸诱导时间及有效作用浓度的研究,建立油酸致建鲤肝细胞脂肪变性模型。本研究以胰蛋白酶消化法获得的原代肝细胞作为实验材料,加入不同浓度油酸(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L)与肝细胞共培养24–48 h,诱导肝细胞脂肪变性,分别收集不同时段的肝细胞及上清液,采用试剂盒测定肝细胞中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量,同时测定上清培养液中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,MTT法测定肝细胞的存活情况,确定油酸最佳诱导浓度,油红O染色法观察细胞内脂肪滴的形成情况。研究结果显示,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养48 h,可以显著提高肝细胞内TG、TC含量(P﹤0.05或P﹤0.01),极显著提高上清培养液中GOT、GPT、LDH、γ-GT的活性,显著降低上清培养液中SOD的活性,但与24 h相比有升高趋势,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养24 h,光镜下可见细胞内有脂肪滴形成,以48 h最明显。综上所述,油酸浓度0.4 mmol/L、诱导时间48 h成功构建了肝细胞脂肪变性模型,为研究鱼类脂肪肝类疾病奠定了基础。