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快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 万超 1 ; 温国元 1 ; 潘兹书 1 ; 张楚瑜 1 ; 熊中良 2 ; 杨峻 2 ; 艾地云 2 ;

作者机构: 1.武汉大学生命科学学院

2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 伪狂犬病毒;荧光定量PCR;定量检测

期刊名称: 中国病毒学

ISSN: 1003-5125

年卷期: 2006 年 21 卷 005 期

页码: 485-489

收录情况: CSCD

摘要: 以伪狂犬病毒(PRV)保守的GE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TAQMAN荧光探针,结合ROTORGENE检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术.该方法线形范围为1.0*102-1.0*107拷贝/μL,灵敏度达102拷贝/μLDNA,比常规PCR高10倍.检测的特异性明显高于常规PCR,同时避免了常规PCR因电泳造成的污染.应用该技术检测66例猪组织或鼻咽拭子样品,阳性42份,阳性检出率为63.6%(42/66).与病毒分离培养、常规PCR相比较结果显示,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,该方法可用于猪场PRV感染的快速定量检测和肉类食品进出口检疫.

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