文献类型： 中文期刊
作者： 陈振海 1 ; 杨金先 1 ; 宋铁英 1 ; 刘晓东 1 ; 林天龙 1 ;
作者机构： 1.福建省农业科学院生物技术研究所
关键词： 重组腺病毒;伪狂犬病病毒;gC蛋白;单克隆抗体
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2007 年 37 卷 08 期
页码： 684-689
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 将表达伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC基因的重组腺病毒经肌肉免疫BALB/c小鼠,测试了重组腺病毒免疫小鼠制备抗目的蛋白单克隆抗体的效果。ELISA分析表明,BALB/c小鼠接种重组腺病毒后能产生针对gC蛋白的特异性抗体。给BALB/c小鼠用大肠杆菌表达的gC融合蛋白MBP-gC-NC加强免疫后第3 d,取小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞在PEG4000作用下进行杂交融合,经筛选、克隆,获得了3株稳定分泌抗PRV gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1B4、1H4和2C8。单抗特性分析结果表明,1B4、2C8属IgG2a亚类,1H4属IgG1亚类;腹水抗体的ELISA效价为1∶2×105~1∶2×106;3株单抗都具有间接免疫荧光试验(IFA)和免疫印迹试验(Western-blotting)反应特性,能够特异地识别PRV gC蛋白。证实重组腺病毒免疫可用于制备目的蛋白单克隆抗体,为制备单抗提供了一种新的方法。
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