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转Fat-1基因猪的制备和整合检测

文献类型： 中文期刊

作者： 华文君 1 ; 毕延震 1 ; 郑新民 1 ; 华再东 1 ; 任红艳 1 ; 李莉 1 ; 肖红卫 1 ; 刘西梅 1 ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： Fat-1;整合;检测

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2017 年 36 卷 10 期

页码： 4085-4089

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了在转基因猪肌肉中高效率表达Fat-1基因,且进一步得到富含ω-3 PUFAs猪品系建立技术基础。将化学合成的人源化Fat-1基因克隆到表达载体上,构建能够在猪细胞中高效表达的质粒构件p MSTN-ω3,使用胚胎原核显微注射方法制备转h Fat-1基因猪。试验对16头供体母猪超数排卵,人工授精配种后手术法冲取320枚1~2细胞期猪胚胎。原核显微注射法向胚胎导入线性化质粒p MSTN-ω3,302枚1~2细胞期胚胎显微注射后移植10头受体母猪,5头母猪妊娠,生产26头仔猪。PCR法检测得到4头转h Fat-1基因阳性猪,Southern印迹杂交分析验证1头猪整合有h Fat-1基因,1头猪近似整合h Fat-1基因。有1头h Fat-1基因整合猪可用于转基因猪育种,表达构件p MSTN-ω3能够用于生产转Fat-1基因猪。试验成功采用显微注射法制备转h Fat-1基因猪,改进、规范了胚胎原核显微注射法制备转基因猪的试验操作程序。

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