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双基因敲除减毒单增李斯特菌(ΔactA/ΔinlB)的构建及其生物学初步鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 丁承超 1 ; 曾海娟 2 ; 钟菲菲 3 ; 陈国薇 1 ; 董庆利 4 ;

作者机构: 1.上海理工大学医疗器械与食品学院

2.甘肃农业大学食品科学与工程学院

3.上海理工大学医疗器械与食品学院湖南省长沙市食品质量安全监督检测中心

4.国家食品安全风险评估中心上海理工大学医疗器械与食品学院农业部农产品质量安全风险评估实验室(杭州)浙江省农业科学院农产品质量标准研究所

关键词: 减毒单增李斯特菌;疫苗载体;actA;inlB;生物特性;细胞侵袭

期刊名称: 现代食品科技

ISSN: 1673-9078

年卷期: 2016 年 07 期

页码: 66-71

收录情况: 北大核心

摘要: 减毒单增李斯特菌具有成为疫苗活载体的潜力,可同时引起MHCⅠ和MHCⅡ类抗原递呈系统,具有强烈激发CD8+和CD4+细胞免疫的能力。构建毒力基因缺失菌株进而评估其生物活性对于其作为疫苗活载体的开发尤为重要。本文采用同源重组技术构建单缺失菌株Lm-△act A和双缺失菌株Lm-△act A△/inl B,从生长状态、毒力基因表达和对Hep G2细胞侵袭能力方面探讨减毒菌株生物学特性。生长活性测定显示两种减毒菌株和野生型Lm(EGD-e)三者生长状况无差异;实时定量PCR结果显示act A基因缺失后,inl A基因表达水平上升两倍;act A和inl B基因双缺失后,plc B和hly基因的表达水平都有较大幅度的上升;侵袭Hep G2细胞结果显示act A基因缺失后侵袭能力增强、act A和inl B基因共同缺失后侵袭能力减弱。因此,减毒菌株的构建及其生物特性研究不仅对食源性致病菌Lm致病机理具有重要意义,也为构建预防人类和动物疫病的疫苗载体奠定了基础。

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[1]畜禽粪便与蝇蛆分离方法研究现状及展望. 周昕,蔡静. 2022

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