文献类型： 中文期刊

作者： 刘双 ¹ ; 赵新 ¹ ; 李瑞环 ¹ ; 刘娜 ¹ ; 兰青阔 ¹ ; 檀建新 ¹ ; 王永 ¹ ;

作者机构： 1.天津市农业科学院生物技术研究所;河北农业大学食品科技学院

关键词： 微滴式数字PCR;转基因耐除草剂大豆‘ZH　10-6’;精准定量;转化体特异性

期刊名称： 中国农业大学学报

ISSN： 1007-4333

年卷期： 2021 年 011 期

页码： 49-58

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为实现转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’转化体成分的精准定量检测,以转基因大豆‘ZH 10-6’的5′端边界序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针浓度进行优化,经特异性测试,建立了耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’的微滴式数字PCR检测方法。结果表明:1)特异性良好:只有以转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’基因组为模板才有扩增信号;2)灵敏度高:在相对标准偏差≤25%的情况下,方法的检出限（LOD）为13.0个拷贝;定量限（LOQ）为66.0个拷贝;3)PCR扩增反应模板含量与样品拷贝数之间线性相关系数R2>0.99,DNA含量线性范围为0.08%～100.00%。综上,本研究建立的转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’转化体定量方法特异性强、稳定性好、准确度和灵敏度高,可用于对转基因大豆品种‘ZH 10-6’的定量检测。