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鲤鱼(Cyprinus carpio)生长激素基因克隆及原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 白俊杰 1 ; 马进 1 ; 简清 1 ; 李新辉 1 ; 罗建仁 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室

关键词: 鲤鱼GH基因,分子克隆,原核表达,促生长

期刊名称: 中国生物化学与分子生物学报

ISSN: 1007-7626

年卷期: 1999 年 15 卷 03 期

页码:

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体总RNA中扩增出编码鲤鱼生长激素(GH)成熟肽基因序列.定向克隆至质粒pUC18,克隆的鲤鱼GHcDNA不含信号肽序列并以新的起始密码子ATG取代鲤鱼GHcDNA第1个密码子TCA.序列分析表明,与Koren报道的鲤鱼GHcDNA相比有两个碱基差异,但推断的氨基酸序列完全一致.将鲤鱼GHcDNA定向克隆至原核表达载体pBV220,构建成重组鲤鱼GH基因表达载体pBVcGH8.SDS-PAGE和薄层扫描分析表明:经42℃诱导,pBVcGH8在大肠杆菌中可表达一分子量约22000的特异蛋白,表达量占细胞总蛋白的29.2%.该基因重组的鲤鱼GH添加到饲料中投喂罗非鱼,证实有明显的促进生长作用

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