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传染性支气管炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 高峰 1 ; 唐应华 2 ; 宫玉珍 2 ; 陈涛 1 ; 陆吉虎 2 ; 吴培培 2 ; 傅童生 1 ; 侯继波 2 ;

作者机构: 1.湖南农业大学

2.江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词: 传染性支气管炎;间接ELISA;抗体检测

期刊名称: 中国家禽

ISSN: 1004-6364

年卷期: 2012 年 34 卷 08 期

页码: 28-31

收录情况: 北大核心

摘要: 为了快速检测针对传染性支气管炎病毒(IBV)抗体,本研究建立相应的间接ELISA(iELISA)检测方法。以本实验室分离的临床毒株DS10为检测抗原,经过差速离心纯化获得DS10病毒作为包被抗原,利用方阵试验,优化一系列条件,最终确定了最佳的ELISA反应条件。抗原最佳包被浓度为0.11mg/mL,血清最适稀释度为1:100,封闭液为含1%BSA的PBST,封闭时间为60min,一抗作用时间90min,HRP标记的兔抗鸡IgG稀释倍数为1:3500,作用时间为60min,显色时间为10min。用iELISA方法和血凝抑制试验(HI)同时检测145份血清样品的结果表明,建立的iELISA方法与常规的HI检测的符合率为92.41%,iELISA和HI的阳性检出率分别为92.41%和90.34%,iELISA的敏感性略优于HI。

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