文献类型： 中文期刊

作者： 肖雨诗 ¹ ; 曹强 ² ; 黄蓉 ³ ; 程雷 ³ ; 刘娜 ² ; 刘欢 ² ; 吴立冬 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院农业农村部水产品质量安全控制重点实验室

3.北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心

关键词： 副溶血弧菌;磁珠提取;DNA提取;PCR;食品微生物检测

期刊名称： 食品科学技术学报

ISSN： 2095-6002

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 165-174

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一种常见的食源性致病菌,为解决副溶血弧菌检测步骤复杂且周期长的问题,研究开发了一种磁珠提取与PCR联用技术快速检测食品中的副溶血弧菌。首先通过碱性共沉淀法完成Fe₃O₄磁珠的制备,随后在室温条件下通过水解正硅酸乙酯完成Fe₃O₄@SiO₂磁珠制备。探讨了正硅酸乙酯添加量对Fe₃O₄@SiO₂磁珠粒径和磁性的影响。以DNA提取能力为目标,已知浓度DNA为提取对象,分析了Fe₃O₄@SiO₂磁珠粒径和提取体系pH值对Fe₃O₄@SiO₂磁珠与DNA结合能力的影响。结果表明,Fe₃O₄@SiO₂磁珠结合副溶血弧菌DNA的较佳粒径为105.89 nm、Fe₃O₄@SiO₂磁珠的SiO₂层为25 nm,此条件下Fe₃O₄@SiO₂磁珠表面光滑、分散性良好、饱和磁化强度高,在磁场的作用下10 s即可完成副溶血弧菌DNA与杂质的分离,副溶血弧菌DNA的提取率高达80%（提取体系pH值为5.0）。采用优化后的Fe₃O₄@SiO₂磁珠进行DNA提取,结合PCR联用技术,对92份市售水产样品（32份对虾、25份牡蛎、35份贻贝）进行副溶血弧菌筛查。结果表明,Fe₃O₄@SiO₂磁珠提取的DNA均可直接用于PCR检测,被测水产样品中有17份样本的副溶血弧菌检测结果为阳性。此技术与国标检测方法（GB 4789.7—2013）相比,检测时间由一周缩短至4 h,提高了副溶血弧菌的检测效率。磁珠提取结合PCR联用技术可检测不同食品中的多种微生物菌种,此研究为食品中的微生物快速检测提供了一种实用新方法。