文献类型： 中文期刊
作者： 熊爱生 1 ; 姚泉洪 1 ; 李贤 1 ; 范惠琴 1 ; 彭日荷 1 ;
作者机构： 1.上海市农业遗传育种重点实验室
关键词： ACC氧化酶基因;ACC合成酶基因;反义基因融合;根癌农杆菌;乙烯;番茄
期刊名称： 实验生物学报
ISSN： 0001-5334
年卷期： 2003 年 06 期
页码： 428-434
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 从番茄品种强力米寿的总DNA中克隆番茄果实特异启动子2A11,以番茄成熟果实的RNA为模板,进行RT-PCR扩增,克隆番茄全长的ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因片段。完成两个基因的克隆和测序后,将888bp的番茄ACC氧化酶基因和943bp的ACC合成酶基因片段串联,构成全长1837bp的融合基因。将该融合基因以反义的方向插入植物双元载体pYPX145中番茄果实表达特异启动子下游,获得ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因融合的植物双元载体pOSACC。该载体外源基因表达单元的两端含两个烟草SAR序列,利于转基因的稳定遗传。以番茄栽培品种合作903子叶和下胚轴为外植体,利用根癌农杆菌进行基因转化,通过200mg/L卡那霉素选择和GUS检测,获得了105株番茄GUS阳性植株,转基因番茄果实在当代表现明显耐贮特点。经过4代的耐贮和果实农艺性状的综合选择,获得了两个表现良好的株系DR-1和DR-2,两株系果实乙烯释放量显著下降,是未转基因材料的9.5%,番茄的贮存期在50天以上。
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