文献类型： 中文期刊

作者： 王珍 ¹ ; 贺磊 ² ; 肖英平 ³ ; 卢先东 ² ; 刘艳红 ² ; 陆雯 ¹ ; 王首锋 ⁴ ;

作者机构： 1.绿城农科检测技术有限公司

2.宁波爱基因科技有限公司

3.浙江省农业科学院

4.浙江大学基础医学院

关键词： 微流控芯片;环介导恒温扩增;蜡样芽孢杆菌;米饭;检测

期刊名称： 浙江大学学报(农业与生命科学版)

ISSN： 1008-9209

年卷期： 2021 年 002 期

页码： 193-202

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立米饭中的蜡样芽孢杆菌微流控芯片恒温扩增快速检测方法,利用蜡样芽孢杆菌公开的hblA基因序列设计引物,加入荧光染料SYTO-9,采用微流控芯片通过环介导恒温扩增进行实时荧光读数,并通过24株菌株验证其特异性;分别用阳性质粒和阳性菌株测试其灵敏度、检出限和重复性。结果表明:2株蜡样芽孢杆菌呈阳性,22株非蜡样芽孢杆菌呈阴性;微流控芯片恒温扩增技术检测蜡样芽孢杆菌菌液的灵敏度为170 CFU/mL,检测时间在35 min内;使用合成的蜡样芽孢杆菌阳性质粒样品,其灵敏度为10μL-1,检测时间在15 min内,比传统分离鉴定方法的灵敏度高10倍;人工污染米饭中蜡样芽孢杆菌的检出限为570 CFU/g,并可在45 min内完成结果判定;蜡样芽孢杆菌阳性质粒检测重复性好,其变异系数（coefficient of variation, CV）为2.02%。综上所述,微流控芯片恒温扩增快速检测方法特异性好、灵敏度高、结果准确,可用于米饭类食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。