文献类型： 中文期刊
作者： 徐黎明 1 ; 刘红柏 1 ; 尹家胜 1 ; 卢彤岩 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
关键词： 传染性造血器官坏死病病毒;病毒表面糖蛋白;原核表达
期刊名称： 病毒学报
ISSN： 1000-8721
年卷期： 2013 年 29 卷 05 期
页码： 529-534
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了建立传染性造血器官坏死病毒的免疫学检测方法,本研究以IHNV-Sn分离株基因组提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出其表面糖蛋白(glycoprotein,G)的基因序列(1527bp)。将该基因克隆到pET27b(+)表达载体中构建出重组质粒pET27b-G,通过大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株获得高效表达。SDS-PAGE电泳分析显示表达蛋白约55kD,大部分以包涵体的形式表达。利用尿素变性复性处理后获得高纯度的纯化蛋白,制备兔抗血清。间接ELISA结果显示,所制备的兔抗血清能够与重组糖蛋白和IHNV-Sn病毒株表面糖蛋白发生特异性反应,与重组蛋白的反应效价为1∶20 000;间接免疫荧光结果显示,该兔抗血清可与IHNV-Sn分离株和IHNV参考毒株产生特异性的荧光,以上结果说明本研究所表达的IHNV糖蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,该研究为IHNV检测方法的建立及疫苗的研制提供了基础材料和理论依据。
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