文献类型: 中文期刊
作者: 王贤达 1 ; 林雄杰 2 ; 胡菡青 2 ; 王宗华 3 ; 范国成 2 ;
作者机构: 1.福建农林大学植物保护学院
2.福建省农业科学院果树研究所
3.福建农林大学
关键词: 柑橘黄龙病菌;钙黄绿素;环介导等温扩增(LAMP);可视化
期刊名称: 热带作物学报
ISSN: 1000-2561
年卷期: 2014 年 35 卷 05 期
页码: 101-107
收录情况: CSCD
摘要: 建立柑橘黄龙病(HLB)可视化环介导等温扩增(LAMP)检测方法,为HLB的快速检测提供有力的技术支持。根据LAMP技术原理,针对柑橘黄龙病菌16S rDNA靶序列的6个位点设计4条特异性引物,通过对反应体系和反应条件的优化,并在反应前的体系中加入1∶10的钙黄绿素(calcein)和氯化锰(MnCl2)混合液作为荧光显色剂,建立可视化LAMP检测技术,同时对该技术的特异性、灵敏度和样品检测进行了测试。该检测方法具有很高的特异性,反应体系中除了HLB具有特异性的扩增,产生黄绿色荧光扩增产物,其他供试菌株均无特异扩增。对柑橘黄龙病菌总DNA的检测限为1.51×10-3 ng/μL,而对含有目的基因的CG-pMD18-T质粒DNA的检测限为2.12×10-6 ng/μL,与定量PCR灵敏度相当,而比常规PCR灵敏度高1 000倍。利用可视化LAMP技术和定量PCR对来自漳州、南平、福州等地的样品进行检测,结果 2种技术的检出率均为76.7%,符合率达到100%。
- 相关文献
[1]葡萄炭疽病可视化LAMP检测体系的建立及应用. 王贤达,郑巧美,陈婷,刘鑫铭,蔡盛华. 2016
[2]马铃薯S病毒PVS~O株系RT-LAMP检测方法的建立及应用. 李华伟,许泳清,罗文彬,纪荣昌,刘中华,许国春,张鸿,李国良,林赵淼,邱永祥,邱思鑫,汤浩. 2018
[3]番石榴焦腐病菌LAMP检测方法的建立及应用. 吴敏亮,张溢溪,兰成忠,刘裴清,李本金,陈庆河,翁启勇. 2013
作者其他论文 更多>>
-
黄龙病发病芦柑根际土壤细菌群落组成与多样性特征
作者:雷美玲;饶文华;胡进锋;岳琪;吴祖建;范国成
关键词:黄龙病;柑橘;高通量测序;根际土壤;细菌群落;差异物种;环境因子
-
米根霉菌纤维素酶活性及其对农田废弃物的降解效果
作者:王伟英;柯叶鑫;李鸿浩;肖顺;王宗华
关键词:米根霉;农业废弃物;纤维素酶;酶活力;发酵
-
福州地区雪柑种质资源调查与优良株系筛选
作者:张艳芳;胡菡青;温寿星
关键词:雪柑;福州;优良株系
-
西番莲叶片矿质元素含量适宜值研究
作者:施清;谢钟琛;王贤达;许家辉;李健
关键词:西番莲;叶片矿质营养;适宜标准;平衡态综合诊断施肥法
-
基于转录组测序筛选与柚裂果相关的基因
作者:卢艳清;林燕金;王贤达;卢新坤
关键词:柚(CitrusgrandisL.Osbeck);裂果;果皮;转录组;抗裂基因
-
福州地区福桔种质资源调查与优良株系筛选
作者:张艳芳;胡菡青;温寿星
关键词:福桔;福州;优良株系;福选1号
-
柑桔黄龙病株分布边缘效应的量化分析
作者:范国成;王贤达;李健
关键词:柑桔黄龙病;边缘侵入效应;二阶中心矩;一阶方位矩