文献类型： 中文期刊

作者： 范一灵 ¹ ; George C.Paoli ² ; 宋明辉 ¹ ; 史贤明 ³ ; 杨美成 ¹ ;

作者机构： 1.国家药品监督管理局微生物检测技术重点实验室上海市食品药品检验研究院

2.美国农业部农业研究局东部研究中心

3.上海交通大学农业与生物学院中美食品安全联合研究中心微生物代谢国家重点实验室

关键词： 免疫磁珠;单链抗体片段;单核细胞增生李斯特菌;英诺克李斯特菌;聚合酶链式反应

期刊名称： 中国食品学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 003 期

页码： 253-262

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:制备一种单核细胞增生李斯特菌的特异性单链抗体捕获磁珠（scFv-IMBs）,通过用人工污染的方式评价scFvIMBs的效果。方法:在不同的增菌培养体系中以市售磁珠（Dyna-IMBs）作为对照,通过定性、定量培养技术和PCR检测技术,分析scFv-IMBs在法兰克福香肠中捕获与分离单核细胞增生李斯特菌和英诺克李斯特菌的能力。结果:在BHI培养基中,scFv-IMBs对单核细胞增生李斯特菌的捕获率介于15%～55%之间,优于Dyna-IMBs（0.85%～1.27%）,显示出良好的特异性。在MOPS-BLEB培养基中两种磁珠的捕获率在62%～88%,捕获率高于在UVM培养基（<5%）和FB培养基（<53%）中。人工污染样品经scFv-IMBs捕获,单核细胞增生李斯特菌的菌落数在选择性培养基上的比例有显著性提升（P<0.01）,可从高浓度英诺克李斯特菌（1∶1 000）中有效分离单核细胞增生李斯特菌。磁珠检测方法的灵敏度可达1 CFU/mL。结论:与市售免疫磁珠产品相比,scFv-IMBs具有较好的特异性,可显著降低体系中英诺克李斯特菌的干扰,具有更好的分离能力。