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应用抑制性差减杂交技术构建副猪嗜血杆菌基因组差减文库

文献类型： 中文期刊

作者： 李淼 1 ; 李春玲 1 ; 宋帅 1 ; 杨冬霞 1 ;

作者机构： 1.广东省农科院兽医研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室

关键词： 副猪嗜血杆菌;抑制性差减杂交;差异基因文库

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2011 年 38 卷 13 期

页码： 128-130

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)有毒力菌株SW124(血清4型)和无毒力菌株H465(血清11型)间的差异表达基因文库,采用抑制性差减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)分析SW124和H465菌株细菌基因组的表达差异,并进行两轮差减杂交和两次PCR扩增,将第2次PCR产物与pMD19-T载体相连,转化大肠杆菌E.coli DH5α感受态细胞并进行文库扩增和蓝白斑筛选,RT-PCR鉴定差异表达文库。结果共获得327个阳性克隆,筛选100个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100～2 000 bp大小的片段。差异DNA差减文库的构建为进一步筛选、克隆HPS特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。

  • 相关文献

[1]应用抑制性差减杂交筛选副猪嗜血杆菌4型菌株可能毒力基因. 李淼,李春玲,宋帅,杨冬霞. 2012

[2]用抑制性差减杂交筛选鸭疫里氏杆菌2型可能毒力基因. 吴芳,蔡建平,陆承平,范红结. 2008

[3]副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达及免疫学性质分析. 谢乐新,李淼,宋帅,岳磊,杨冬霞,李春玲. 2013

[4]副猪嗜血杆菌广东分离株外膜蛋白P5基因的克隆及蛋白结构预测. 陈善真,王贵平,曾振灵,李春玲,贾爱卿,杨冬霞. 2010

[5]副猪嗜血杆菌ERIC-PCR指纹图谱多样性研究. 贾爱卿,李春玲,王贵平,杨冬霞. 2010

[6]副猪嗜血杆菌lpxL基因介导的生物被膜形成及黏附入侵能力的分析. 席振军,秦翠丽,宋帅,张昆丽,勾红潮,李春玲. 2020

[7]基于重组外膜蛋白P2的副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA方法的建立. 李淼,李春玲,叶严锋,宋帅,杨冬霞. 2011

[8]副猪嗜血杆菌hhdB基因的鉴定和分析. 宋帅,李春玲,杨冬霞,李淼. 2010

[9]副猪嗜血杆菌OMP P5间接ELISA抗体检测方法优化. 臧莹安,黄彩梅,李婉雁,李淼,宋帅,李春玲. 2012

[10]广东地区副猪嗜血杆菌KRG血清分型及基因分型多态性分析. 贾爱卿,李春玲,王贵平,杨冬霞,何丽丽. 2010

[11]4512血清型副猪嗜血杆菌外膜蛋白提取及分析. 臧莹安,李婉雁,庞木生,李淼,宋帅,李春玲. 2013

[12]副猪嗜血杆菌hhdB-A基因的鉴定和分析. 宋帅,李春玲,李淼,杨冬霞. 2010

[13]基于截短表达的外膜蛋白P5的间接ELISA方法建立. 李淼,李春玲,宋帅,杨冬霞,徐志宏. 2016

[14]广东地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定. 何丽丽,李春玲,王贵平,贾爱卿,杨冬霞,宣春玲,郑铁锁,王金生. 2010

[15]百迪康消毒剂对副猪嗜血杆菌的杀灭试验. 冷淑珍,黄元,梁瑞玲,李惠华,郑庆禄. 2010

[16]副猪嗜血杆菌OMP5基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立. 陈善真,李春玲,贾爱卿,王贵平. 2011

[17]副猪嗜血杆菌广东分离株对断奶仔猪的毒力测定. 李淼,王贵平,李春玲,杨冬霞,宋帅. 2011

[18]副猪嗜血杆菌sapA基因克隆与生物信息学分析. 郭海祥,李艳,郭怡德,宋帅,勾红潮,臧莹安,李春玲. 2021

[19]副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5对豚鼠树突状细胞成熟及功能影响. 佘志成,范红结,李春玲,王贵平,贾爱卿,杨冬霞. 2011

[20]副猪嗜血杆菌病原夹心ELISA检测方法的建立及应用. 宋帅,李春玲,臧莹安,郭海祥,李淼,杨冬霞,徐志宏. 2016

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