文献类型: 中文期刊
作者: 张茂 1 ; 邹娴 2 ; 林纯 2 ; 刘德武 2 ; 吴珍芳 2 ; 蔡更元 1 ;
作者机构: 1.广东省农业科学院畜牧研究所畜禽育种国家重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室
2.华南农业大学动物科学学院
关键词: 宇佐美曲霉;木聚糖酶;哺乳动物细胞;分泌表达
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2012 年 39 卷 01 期
页码: 23-27
收录情况: 北大核心
摘要: 本试验旨在从宇佐美曲霉菌株GIM3.36中克隆得到木聚糖酶基因xyn的成熟肽编码序列(555bp),并将其克隆到真核表达载体pcDNA6/HisTM A中的不同位置,分别得到重组质粒pcDNA-spna和pcDNA-spnb,重组质粒经过酶切、测序鉴定其读码框的正确性。在脂质体介导下将重组质粒转染猪肾细胞(PK15),通过RT-PCR证实其在PK15细胞中表达,并在细胞培养液中测定木聚糖酶酶活,结果显示,重组质粒pcDNA-spna转染细胞后表达的酶活力最高为8.53U/mL,较pcDNA-spnb表达的酶活(6.87U/mL)高24%,实现了微生物基因在哺乳动物细胞的分泌表达,为xyn基因在转基因方面的利用提供了依据。
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