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海洋微生物信号降解酶基因aiiA克隆与表达载体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 丁贤 1 ; 殷波 2 ; 张善夫 3 ; 唐维可 3 ; 孙威文 4 ; 周世宁 4 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院南海水产研究所农业部南海渔业资源开发利用重点实验室

2.中科院南海海洋研究所LTO国家重点实验室

3.淮安大江水产饲料有限公司

4.中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室

关键词: 细菌;信号降解酶因aiiA;克隆

期刊名称: 中国微生态学杂志

ISSN: 1005-376X

年卷期: 2012 年 24 卷 06 期

页码: 485-489

收录情况: CSCD

摘要: 根据已知的微生物信号降解酶基因aiiA的序列设计、合成特异性引物探针,以从海洋分离的微生物ZD02的基因组为模板,PCR扩增编码蛋白aiiA信号降解酶的基因aiiA序列,产物经PCR验证后用于构建克隆载体pMD18-ZD02aiiA,并以此克隆载体为模板,以带酶切位点的引物扩增基因,经BamHI和EcoRI双酶切后将其插入表达载体pET-17b,构建原核表达质粒pET-ZD02aiiA。经酶切、PCR鉴定及序列测定等,结果表明:克隆基因已正确插入到载体的多克隆位点,序列和读码框正确,为海洋微生物ZD02信号降解酶基因的体外重组和诱导表达研究打下基础。

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