文献类型： 中文期刊

作者： 查国飞 ¹ ; 唐应华 ² ; 陆吉虎 ² ; 陈辉 ² ; 刘振兴 ² ; 田震 ² ; 侯继波 ² ; 李培英 ¹ ;

作者机构： 1.安徽农业大学动物科技学院

2.江苏省农业科学院/国家兽用生物技术工程技术研究中心

关键词： 禽流感病毒;HA蛋白;杆状病毒;活性

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2014 年 46 卷 03 期

页码： 15-19

收录情况： 北大核心

摘要： 通过PCR方法从人工合成的质粒(232HAc-T)扩增获得全长的HA基因和缺失信号肽及跨膜区的HA基因。将此HA基因克隆至杆状病毒表达系统,构建重组穿梭载体rBac-232HAc和rBac-232HAδST,转染Sf9细胞后获得重组的杆状病毒rAc-232HAc和rAc-232HAδST。重组病毒在Sf9细胞中表达2种重组蛋白232HAc和232HAδST。2种蛋白在SDS-PAGE和Western blot检测中均获得预期目的条带,间接免疫荧光(IFA)检测呈阳性。血凝试验结果显示,232HAc蛋白能够使红细胞凝集,血凝(HA)效价为8log2;而232HAδST的HA效价低于2log2。血凝抑制试验结果表明,232HAc蛋白与H5阳性血清反应良好,效价类似于H5检测抗原对照,但不与其他病毒血清反应。结果提示:2种重组蛋白均能在Sf9细胞中表达,但重组232HAc蛋白能具有较好的血凝性,并能被H5阳性血清特异性抑制。本研究为研发H5亚型禽流感HA蛋白亚单位疫苗提供了生物材料。