文献类型： 中文期刊

作者： 张昆丽 ¹ ; 林本夫 ² ; 席振军 ¹ ; 杨冬霞 ¹ ; 卞志标 ¹ ; 宋帅 ¹ ; 蒋智勇 ¹ ; 蔡汝健 ¹ ; 李春玲 ¹ ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

2.广州市花都区动物卫生监督所

关键词： 猪链球菌;谷氨酸脱氢酶基因;纳米PCR;临床诊断

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2021 年 36 卷 004 期

页码： 212-217

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立一种高效、灵敏的猪链球菌(SS)检测方法,针对SS的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)合成特异性引物,通过优化退火温度与引物浓度,经特异性、敏感性、重复性以及临床样品检测,建立了SS的纳米PCR检测方法.特异性试验结果显示,该方法仅能从SS的基因组序列中扩增得到687 bp的特异性序列,与猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌无交叉反应,且能同时识别1、2、7和9型4个目前流行的SS主要血清型,满足临床上多血清型SS感染检测的需要;敏感性试验结果显示,该方法对SS的最低检测下限为10 cfu/mL,与普通PCR方法相比,灵敏度提高了100倍;重复性试验表明,该方法检测效果稳定,重复性较好.用该方法和普通PCR对临床上收集的44份疑似SS感染样品进行检测,阳性率分别为72.7%(32/44),54.5%(24/44),表明该纳米PCR方法具有灵敏度高,特异性好等优点.综上,本研究建立的SS纳米PCR检测方法,能够准确、高效检测SS,为猪链球菌病的临床诊断和流行病学调查提供了技术支持.