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转基因小麦根际土壤镰刀菌Real-time QPCR方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王秀宇 1 ; 林凡云 2 ; 吴季荣 2 ; 曹欢 2 ; 史建荣 2 ;

作者机构： 1.南京农业大学植物保护学院植物病理学系

2.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所

关键词： 转基因小麦;镰刀菌;实时荧光定量PCR;绝对定量

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2012 年 28 卷 05 期

页码： 1163-1167

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 对转基因抗病小麦根际土壤中镰刀菌含量进行绝对定量,建立了实时荧光定量PCR(Real-time QPCR)检测体系。应用该反应体系,对转基因小麦各个生长时期的镰刀菌拷贝数进行绝对定量。结果表明,镰刀菌通用引物具有较好的特异性;Real-time QPCR反应的扩增曲线中各梯度标准质粒的循环阈值间隔均匀,溶解曲线峰值较突出,该标准曲线的相关系数(r)=0.999 20,斜率为-3.203,计算其扩增效率为105%,符合荧光定量PCR方法中对各项指标的要求。应用试验结果表明,在转基因小麦的播种前期、灌浆期、成熟期镰刀菌数量较低,在苗期、返青期、拔节期镰刀菌数量较高。

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