文献类型: 中文期刊
作者: 白俊杰 1 ; 马进 2 ; 简清 2 ; 李新辉 2 ; 罗建仁 2 ; 林文辉 2 ; 张红军 2 ;
作者机构: 1.农业部热带亚热亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室
2.农业部热带亚热亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室!中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州510380,农业部热带亚热亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室!中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州510380,农业部热带亚热亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室!中国水产科学
关键词: 鱼生长激素;基因改造;表达水平;大肠杆菌;RNA二级结构
期刊名称: 中国水产科学
ISSN: 11-3021/S
年卷期: 2000 年 7 卷 01 期
页码: 31-34
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 采用聚合酶链反应 (PCR)技术对鲤和鲑生长激素cDNA的 5’端和 3’端进行定向改造。将改造后的5种基因分别克隆到大肠杆菌表达质粒 pBV2 2 0进行原核表达 ,以研究鱼生长激素基因在大肠杆菌中的表达水平。实验结果表明 :(1)核糖核蛋白体结合位点 (SD)与起始密码子AUG之间的距离对鱼生长激素的表达水平有影响 ;(2 )鲑生长激素基因的终止密码子UAG可能不会有效终止该基因在大肠杆菌中翻译的进行而造成部分通读 ,加入大肠杆菌强终止码UAA可避免通读和产生超长蛋白 ;(3)对鲤和鲑生长激素cDNA的 5’端和 3’端进行相同的修饰 ,但两者生长激素的表达量却有很大差异 ,说明基因的密码子偏性对表达水平有影响 ;(4 )提高 5’端RNA二级结构自由能和密码子的适配指数有利于外源基因的高效表达
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