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中华绒螯蟹4E-BP1基因的克隆、表达特征及其在蜕壳中的作用

文献类型: 中文期刊

作者: 冯文荣 1 ; 冯伟 1 ; 张明胤 2 ; 于凡 1 ; 李建林 1 ; 苏胜彦 1 ; 唐永凯 1 ; 徐跑 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业与种质资源利用重点实验室

2.南京农业大学无锡渔业学院

关键词: 中华绒螯蟹;4E-BP1;蜕壳;基因克隆;基因表达

期刊名称: 中国水产科学

ISSN: 1005-8737

年卷期: 2022 年 012 期

页码: 1714-1727

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 真核翻译起始因子4E结合蛋白1 (4E-BP1)是mTOR信号通路下游的翻译抑制因子,调节翻译的起始和蛋白质的合成。为探究中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis) 4E-BP1基因特征、时空表达模式及其在蜕壳过程中的潜在作用本研究利用RACE技术克隆获得中华绒螯蟹Es4E-BP1全长cDNA序列,利用qPCR技术探究其时空表达,利用dsRNA干扰探究其在中华绒螯蟹蜕壳中的作用。测序结果显示,Es4E-BP1 cDNA全长1678 bp,包括134 bp的5非编码区、1193 bp的3’ 非编码区和351 bp的开放阅读框。氨基酸序列分析发现,Es4E-BP1含有1个eIF4E超级家族的典型保守域,且包含1个超二级结构TOS基序和1个YXXXXLΦ基序。多序列比对和系统进化树分析显示Es4E-BP1与蓝蟹(Callinectes sapidus)、三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)聚为一支并且具有很高的同源性(95.69%和93.16%)。qPCR结果显示,Es4E-BP1在成蟹各个组织均有表达,其中Y器官表达量最高,其次为肌肉,鳃丝中表达量最低。一个完整蜕壳周期内,幼蟹不同组织表达模式不同,但均在蜕壳后期A-B期表达量最高,蜕壳前期表达量较低。注射ds Es4E-BP1后,中华绒螯蟹存活率远低于对照组CG组;蜕壳间隔显著高于CG组。研究结果表明,Es4E-BP1在中华绒螯蟹各组织中广泛表达,在调控蜕壳生长中具有重要作用,为进一步研究甲壳动物4E-BP1基因提供了重要参考。

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