文献类型： 中文期刊

作者： 徐永江 ¹ ; 柳学周 ¹ ; 张凯 ² ; 武宁宁 ³ ; 刘芝亮 ¹ ; 李春广 ⁴ ;

作者机构： 1.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室

2.青岛贝宝海洋科技有限公司

3.青岛市海洋与渔业局渔业技术推广站

4.绍兴市鸿港农业开发有限公司

关键词： 半滑舌鳎;IGF-Ⅱ;原核表达;生物活性

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2015 年 36 卷 04 期

页码： 51-56

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为在蛋白水平认识半滑舌鳎类胰岛素生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的生理功能,将IGF-Ⅱ成熟肽序列克隆到原核表达载体p ET-28a中,成功构建了重组半滑舌鳎IGF-Ⅱ/p ET28a质粒,导入到E.coli BL21(DE3)菌株后经IPTG诱导,获得了大小为11.4 k Da的重组IGF-Ⅱ蛋白,N端含6个组氨酸,可特异性地被6×His抗体识别。重组IGF-Ⅱ蛋白在最优诱导条件37℃诱导2 h,目的蛋白表达量占重组表达菌总蛋白的43.7%,重组蛋白主要以包涵体存在。将获得的重组蛋白包涵体经变性、纯化和复性后,获得了纯化的IGF-Ⅱ重组蛋白,其可在体外显著促进人乳腺癌MDA231细胞的增殖,表明IGF-Ⅱ重组蛋白具有体外细胞水平的生物活性。本研究结果可为认识鱼类IGF-Ⅱ生理功能及半滑舌鳎生长调控机制提供理论支撑。