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黄鳝irf9基因鉴定及功能研究

文献类型: 中文期刊

作者: 陈曦 1 ; 张小龙 1 ; 杨雨桐 1 ; 王昱杰 1 ; 袁泉 2 ; 李名友 1 ; 周文宗 2 ; 张庆华 1 ;

作者机构: 1.上海海洋大学

2.上海市农业科学院生态环境保护研究所

关键词: 黄鳝;干扰素调节因子9(IRF9);基因克隆;序列分析;抗菌

期刊名称: 上海农业学报

ISSN: 1000-3924

年卷期: 2025 年 41 卷 005 期

页码: 26-34

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 干扰素调节因子9(Interferon regulatory factors,IRF9)可与STAT通路结合发挥抗病毒作用,但在合鳃鱼中有关IRF9抗细菌的功能和机制研究相对匮乏。为此,本试验以黄鳝为研究对象,采用PCR、Western blot、免疫荧光、双荧光素酶报告基因试验,检测了黄鳝Ma IRF9的分子量和亚细胞定位,并对健康黄鳝以及嗜水气单胞菌攻毒的黄鳝进行了组织表达检测,明确了Ma IRF9可以参与机体抗细菌免疫的功能,并对Ma IRF9参与抗细菌免疫的机制进行了初步探究。结果表明:Mairf 9 CDS全长为1 290 bp,编码429个氨基酸,蛋白大小为48.46 kDa,理论等电点为7.23。多重序列对比显示,大刺鳅IRF9与黄鳝IRF9聚为一支,亲缘关系较近。RT-qPCR结果显示,IRF9在黄鳝组织内广泛表达。使用嗜水气单胞菌进行攻毒后,在检测的肝、脾、肾、脑、心、肌肉、性腺和后肠8个组织中,除肝之外,Mairf 9均在不同时间段内上调,证明其参与了黄鳝对嗜水气单胞菌感染的免疫过程。免疫荧光结果显示,Ma IRF9为细胞核蛋白,能与细胞核共定位。双荧光素酶报告基因结果显示,Ma IRF9通过激活NF-κB通路来抵抗嗜水气单胞菌的感染。本研究初步解析了黄鳝IRF9的蛋白序列信息及其抗菌机制,为未来的抗病研究奠定了理论基础。

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