文献类型： 中文期刊

作者： 马志宏 ¹ ; 姜娜 ¹ ; 邢薇 ¹ ; 李铁梁 ¹ ; 袁丁 ¹ ; 李文通 ¹ ; 李炯棠 ¹ ; 罗琳 ¹ ;

作者机构： 1.北京市水产科学研究所渔业生物技术北京市重点实验室;中国水产科学研究院生物技术研究中心

关键词： Hepcidin;锦鲤;克隆;序列分析;基因表达

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2017 年 44 卷 02 期

页码： 325-335

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆锦鲤Hepcidin全长c DNA序列(k-hepc),并获得此基因在鱼体内的表达模式。【方法】利用RT-PCR和RACE PCR的方法,从锦鲤肝脏中克隆锦鲤Hepcidin的全长c DNA,进行序列测定和分析;锦鲤经肌肉注射维氏气单胞菌0、4、8、12、24和48 h后,分别取其肝、脾、肾、肠、脑、心、肌肉和鳃组织,采用实时荧光定量PCR的方法,以β-actin为内参基因,检测k-hepc基因的表达量。【结果】锦鲤抗菌肽(Gen Bank登录号KC795559)全长755 bp,编码序列276 bp,编码91个氨基酸,包括信号肽、原肽和成熟肽,成熟肽C端含有8个半胱氨酸,可形成4个分子内二硫键。与已报道的普通鲤鱼Hepcidin氨基酸序列的一致性为93%,与其他鱼类Hepcidin氨基酸序列的一致性为29%-93%。在本研究所检测的正常锦鲤的组织中,k-hepc均有表达,其中在肝组织中表达量最高,鳃组织中表达量最低。经维氏气单胞菌感染后,k-hepc在肝和心组织中的表达量明显增加,在其余组织中变化不显著。【结论】k-hepc编码的蛋白是Hepcidin家族的成员之一。锦鲤Hepcidin的表达主要受内在调节因素影响。