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可视化-环介导等温扩增技术检测肠出血性大肠杆菌O157:H

文献类型： 中文期刊

作者： 夏学峰 1 ; 张碧成 1 ; 王警 1 ; 张红印 1 ; 张雪寒 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室;江苏大学食品与生物工程学院;江苏省动物疫病预防控制中心

关键词： 肠出血性大肠杆菌;z3276基因序列;环介导等温扩增技术;横向流动试纸条

期刊名称： 食品安全质量检测学报

ISSN： 2095-0381

年卷期： 2020 年 05 期

页码： 1561-1565

摘要： 目的建立可视化的环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)联合横向流动试纸条(lateral flow dipstick,LFD)方法检测肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)0157:H7的分析方法。方法以EHEC 0157:H7的遗传标志性基因z3276基因序列为检测靶标设计6条LAMP特异性引物,其中2条环引物分别标记异硫氰酸荧光素和地高辛,用LFD检测扩增产物,建立EHEC0157:H7 LAMP-LFD检测方法。结果所建立的检测方法能够特异性的检测EHEC 0157:H7,与试验对照菌株EHEC 026、0145、045、0121,及其他主要大肠杆菌血清型025、078、0103、O111、0127、0138、0139、0141,及禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)E058、肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)SEC627、EPEC SEC689、K12-MG1655、BL21,和其他种属的受试菌,不存在交叉反应;对EHEC 0157:H7纯培养物的最低检测限为1.3 CFU/mL。结论本研究所建立的LAMP-LFD检测方法特异性和敏感性良好,操作简单,结果可视。

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