文献类型： 中文期刊

作者： 丁雅雯 ¹ ; 代金福 ¹ ; 岑怡 ¹ ; 范睿 ¹ ; 伍宝朵 ¹ ; 郝朝运 ¹ ; 胡丽松 ¹ ;

作者机构： 1.海南大学林学院;中国热带农业科学院香料饮料研究所;农业农村部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室;海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室

关键词： 胡椒;外植体灭菌;愈伤诱导;体细胞胚胎发生

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2023 年 44 卷 011 期

页码： 2305-2311

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 胡椒是世界知名香料作物,素有"香料之王"的美誉.建立胡椒组培再生技术,对于提升种苗繁育效率,支撑产业快速发展具有重要的应用价值.本研究以我国胡椒主栽品种热引 1 号(Piper nigrum c.v.Reyin-1)为材料,系统研究外植体灭菌、愈伤诱导、体细胞胚分化等关键环节对体细胞再生的影响,并建立胡椒体细胞再生和组培苗繁育技术.结果表明:以成熟的种子为材料,首先用 75%酒精表面灭菌 45 s,去除果皮后再用 75%酒精对种子灭菌 45 s后,0.1%氯化汞浸泡灭菌 6~10 min,获得无菌种子.无菌的胡椒种子在黑暗条件下萌发 2 周后获得脱落的外种皮作为胡椒组培体系的外植体.在黑暗条件下,以胡椒外种皮为外植体诱导愈伤及分化培养,培养 2 个月后发现珠孔部位可诱导出愈伤组织,培养基MS+1.5%蔗糖+0.80 mg/L 2,4-D+1.200 mg/L KT为最佳的愈伤组织诱导和胚性愈伤分化培养基,愈伤组织诱导率为 88.14%,胚性愈伤分化率约为 58.18%;将愈伤组织接种在体胚诱导培养基上,培养 3 个月后发现培养基MS+1.5%蔗糖+0.40 mg/L 2,4-D+0.600 mg/L KT为最佳的体胚诱导培养基,体胚诱导率为 13.33%;将幼苗接种在生根培养基上,培养基 1/2MS+1.5%蔗糖+0.25%活性炭为最佳生根壮苗培养基,培养 2 个月后获得胡椒组培苗.综上所述,本研究提出了利用酒精和氯化汞组合的外植体灭菌方法,明确了胡椒的外种皮珠孔组织是高效适宜的组织培养外植体;进一步分析了愈伤诱导、体胚分化、生根培养等体细胞胚胎发生关键过程中的培养基组合及培养条件.研究结果为胡椒高通量组培苗繁育和转基因育种技术研发奠定基础.