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弗氏柠檬酸杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR诊断方法的建立及耐药性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 王芳 1 ; 康超 1 ; 李永霞 1 ; 余波 2 ; 周思旋 2 ; 罗永成 3 ; 马永兵 4 ;

作者机构： 1.贵州省生物研究所

2.贵州省畜牧兽医研究所

3.贵州省水产技术推广站

4.贵州省贵阳市水产技术推广站

关键词： 弗氏柠檬酸杆菌;荧光定量PCR;快速诊断;耐药性

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2016 年 44 卷 11 期

页码： 286-289

收录情况： 北大核心

摘要： 根据GenBank中弗氏柠檬酸杆菌ompA基因序列,设计1对特异性引物,PCR扩增弗氏柠檬酸杆菌ompA基因片段,T克隆到pMD-18T载体上构建标准阳性质粒。通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件优化,建立弗氏柠檬酸杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断方法,结果显示重复性好、特异性高,灵敏度可达1.0×10~1拷贝/μL,说明建立的弗氏柠檬酸杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法适合于弗氏柠檬酸杆菌病临床疑似病料样品的快速诊断。对分离得到的83株弗氏柠檬酸杆菌进行药敏试验,结果表明冷水鱼养殖中耐药性问题日益严重。

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