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含绿色荧光蛋白及trp3~(iar)基因的草菇表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 孙晓红 1 ; 姚泉洪 2 ; 陈明杰 3 ; 潘迎捷 4 ;

作者机构： 1.南京农业大学生命科学学院

2.上海市农业科学院生物中心

3.上海市农业科学院食用菌研究所

4.上海水产大学

关键词： 草菇;EGFP基因;trp3iar基因;表达载体

期刊名称： 上海水产大学学报

ISSN： 1004-7271

年卷期： 2006 年 15 卷 01 期

页码： 12-16

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分别用限制性内切酶EcoR I和HindIII酶切质粒pBGgHg,将切下的含双孢蘑菇gpd启动子、EGFP基因和35S终止子的碱基序列连接到含Ap抗性的pBSK II上,再将这一段序列切下连接到含kan抗性的pCAMBIA1300载体上,形成中间质粒载体YH2873。用限制性内切酶HindIII分别酶切质粒YH2873和质粒pDB06,将从pDB06切下的trp3iar基因连接到中间质粒载体YH2873上,得到表达载体pSAGF。中间载体pYH2873经限制性内切酶EcoR I和HindIII酶切,电泳后显示1.3 kb的目的片断和9 kb的载体片断,表达载体pSAGF经限制性内切酶HindIII酶切,电泳后显示4 kb的trp3iar基因的目的片断和10 kb的载体片断,进一步测序证明重组质粒连接正确,成功构建了草菇的表达载体pSAGF。

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