文献类型: 中文期刊
作者: 郭兆奎 1 ; 杨谦 1 ; 姚泉洪 2 ; 万秀清 3 ; 颜培强 3 ;
作者机构: 1.哈尔滨工业大学生命科学与工程系
2.上海市农业科学院生物技术中心
3.黑龙江省烟草科学研究所
关键词: 酿酒酵母;HAL1基因;烟草;K+含量
期刊名称: 中国烟草学报
ISSN: 1004-5708
年卷期: 2006 年 12 卷 05 期
页码: 46-51
摘要: 提取酿酒酵母总RNA进行RT-PCR反转录,根据HAL1基因(GeneID:856113)序列设计阅读框引物,对反转录产物进行PCR扩增,并进行全序列测定,构建筛选标记为带内含子的Km抗性基因的植物双元表达载体,经根癌农杆菌介导法将HAL1基因导入烟草品种龙江911和K326中,进行卡那霉素抗性筛选、GUS染色、目的基因扩增和HAL1基因mRNA荧光定量PCR检测,并对T1代各转化烟草材料烟叶含钾量进行化验分析。测序结果证实PCR扩增得到的DNA与酿酒酵母HAL1基因序列相同,获得抗卡那霉素、GUS阳性的转化植株12株。经PCR扩增检测证实HAL1基因已整合入转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析结果表明HAL1基因已在烟苗根系表达,烟叶含钾量化验结果证明HAL1基因可使烟叶含钾量提高30%。
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