文献类型： 中文期刊

作者： 赵为民 ¹ ; 涂枫 ¹ ; 王泽平 ¹ ; 程金花 ¹ ; 付言峰 ¹ ; 李碧侠 ¹ ; 任守文 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院畜牧研究所

关键词： 大鼠;Inhba基因;CRISPR/Cas9;外显子;sgRNA;基因编辑

期刊名称： 湖南农业大学学报(自然科学版)

ISSN： 1007-1032

年卷期： 2021 年 47 卷 006 期

页码： 700-704

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用chopchop网站对大鼠Inhba基因的第二外显子设计sgRNA位点,通过合成sgRNA寡核苷酸、酶切连接构建到px330载体,再转染px330–Inhba–sgRNA载体到大鼠L6细胞,通过T7E1酶切、T载体克隆测序来验证sgRNA编辑Inhba基因的效率.结果表明:转染pX330–Inbha–sgRNA载体后,Inhba基因的编辑区域的PCR产物能被T7E1酶切割预期条带;T载体克隆测序显示,随机选取的20个单克隆中有5个克隆在预期切割位点附近出现不同长度的碱基缺失,估测编辑效率为25%.可见,本研究设计的sgRNA能够有效利用CRISPR/Cas9系统对Inhba基因进行编辑.