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副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达及免疫学性质分析

文献类型： 中文期刊

作者： 谢乐新 1 ; 李淼 2 ; 宋帅 2 ; 岳磊 2 ; 杨冬霞 2 ; 李春玲 2 ;

作者机构： 1.广东省动物防疫物资储备中心

2.广东省农业科学院

关键词： 副猪嗜血杆菌;外膜蛋白P5;抗原性分析

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2013 年 28 卷 05 期

页码： 48-52

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达产物,并对各片段的免疫学性质进行鉴定。采用生物信息学软件分析Omp P5全长基因,设计3对分段引物,PCR分别从HPS汕头分离株(H0801)Omp P5中扩增出P5F1、P5F2和P5F3基因片段,构建于pET-32a(+)原核表达载体上,并将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE分析蛋白表达情况。将蛋白纯化后,利用ELISA及Western Blot分别鉴定其免疫原性及抗原性。结果表明,扩增得到的Omp P5的3个基因片段与预期大小相符合,基因测序结果与GenBank公布的序列一致,经SDS-PAGE分析,3个蛋白表达相对分子质量大小都与预期相符。ELISA和Western Blot分析显示,表达的3个蛋白表现出良好的抗原性和免疫原性。HPS Omp P5的分段表达为进一步研究HPS保护性表位及疫苗鉴定奠定了新的基础。

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