文献类型： 中文期刊

作者： 梁佳茗 ¹ ; 钱晶 ² ; 卜昭阳 ³ ; 郎需龙 ⁴ ; 王莉; 王秀然; 杨艳玲; 王晓旭; 屈海龙; 王兴龙;

作者机构： 1.吉林农业大学动物科技学院

2.军事医学科学院军事兽医研究所

3.江苏省农业科学院兽医研究所

4.中国农业科学院特产研究所

关键词： 牛布鲁菌;Omp31基因;重组细菌活载体;疫苗候选株

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2019 年 2 期

页码： 260-264

摘要： 为提高布鲁菌疫苗株的免疫保护效果,本试验以牛布鲁菌疫苗株S19为研究对象,将羊布鲁菌Omp31基因克隆、扩增并插入至广宿主质粒pBBR1MCS-2中,构建重组质粒pBBR1MCS-Omp31;通过电转化的方式转入S19感受态细胞中,经抗性基因筛选和PCR验证,获得重组牛布鲁菌S19-Omp31株;该重组菌株连续传25代未发现重组质粒和Omp31基因丢失,表明其遗传稳定性良好;进一步经SDS-PAGE检测可见约26 000相对分子质量的目的条带,采用Western blot法检测显示目的蛋白可与His单克隆抗体及Omp31蛋白高免血清反应.本研究构建的重组牛布鲁菌S19-Omp31株能够稳定表达目的基因,为进一步开展S19-Omp31株的免疫效果评价奠定基础.