文献类型： 中文期刊

作者： 石磊 ¹ ; 苗利娟 ¹ ; 齐飞艳 ¹ ; 张忠信 ¹ ; 高伟 ¹ ; 孙子淇 ¹ ; 黄冰艳 ¹ ; 董文召 ¹ ; 汤丰收 ¹ ; 张新友 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院经济作物研究所/农业部黄淮海油料作物重点实验室/河南省油料作物遗传改良重点实验室/花生遗传改良国家地方联合工程实验室

关键词： 花生;Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因(SAD);启动子;基因组步移;GUS报告基因

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2016 年 42 卷 11 期

页码： 1629-1637

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： Δ~9-硬脂酰-ACP脱氢酶(SAD)是决定植物体内饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸比值的关键酶。以花生品种豫花9326基因组DNA为模板,通过基因组步移技术,克隆到花生Δ~9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因(Ah SAD)起始密码子ATG上游720 bp片段,利用5'RACE方法获得了该基因的5'UTR序列,通过序列比对确定720 bp片段为Ah SAD启动子区域。PLACE在线启动子预测分析表明,该序列具有真核生物启动子必需的核心元件TATA-box和CAAT-box,含有多个与光诱导和激素响应相关顺式序列元件。将Ah SAD启动子片段替换pBI121质粒中的CaMV35S启动子驱动下游GUS基因表达,构建植物表达载体pBI-PAh SAD。通过农杆菌介导法转化拟南芥和在花生不同组织中瞬时表达,利用GUS组织化学染色研究其表达特性。表明在拟南芥和花生受体中,AhSAD启动子主要调控下游基因在根、茎、叶片和子叶中表达,在花生的果针中也检测到GUS活性;拟南芥的茎生叶只有叶脉中具有GUS活性,而花生整个叶片中都具有GUS活性。