文献类型： 中文期刊

作者： 名晓东 ¹ ; 郭自涛 ¹ ; 陈剑雄 ¹ ; 顾正华 ¹ ; 辛瑜 ¹ ; 孙海彦 ² ; 关彦明 ³ ; 张梁 ¹ ;

作者机构： 1.江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

3.中国食品发酵工业研究院有限公司

关键词： 卤代烷脱卤酶;大肠杆菌;发酵优化;响应面法

期刊名称： 食品与发酵工业

ISSN： 0253-990X

年卷期： 2022 年 013 期

页码： 16-24

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 对产卤代烷脱卤酶的重组大肠杆菌BL21（DE3）/pET28a-DhaA进行发酵优化以提高其表达量。该研究从TB培养基出发，通过单因素实验与响应面实验在摇瓶水平上对培养基各成分进行优化；其次，在最优培养基的基础上对发酵的工艺条件进行优化；最后，在5 L发酵罐中进行了初步放大验证。结果表明，最优的培养基组成为：甘油10 g/L,酵母粉23 g/L,蛋白胨14 g/L,MgSO₄·7H₂O 1.3 g/L,ZnSO₄·7H₂O 0.1 g/L,酶活力可达到（1 182.94±10.86） U/L,较初始培养基提高了94%;最优的发酵工艺条件为：接种量5%,装液量40 mL/250 mL,37℃培养至OD₆₀₀为1.8时加入终浓度为0.4 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷于20℃诱导22 h,酶活力可达到（3 585.83±15.02） U/L,提高至未进行优化前的5.87倍；5 L发酵罐初步放大验证实验中，酶活力最高达到（9 682.62±191.16） U/L,提高至摇瓶水平的2.7倍。通过在摇瓶水平对发酵培养基与工艺进行优化，以及在5 L发酵罐中进行放大验证，极大地提高了卤代烷脱卤酶的酶活力，为放大生产奠定了基础。