文献类型： 中文期刊

作者： 李玲 ¹ ; 祝博森 ¹ ; 朱婷 ¹ ; 钟睿 ¹ ; 孙田野 ¹ ; 林晗 ¹ ; 洪伟鸣 ¹ ; 徐海 ² ;

作者机构： 1.江苏农牧科技职业学院

2.江苏省农业科学院泰州农科所

关键词： T7噬菌体;培养工艺;纯化工艺;内毒素

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2025 年 53 卷 020 期

页码： 88-91

摘要： 为降本增效,制备高品质T7噬菌体,分别开展培养及纯化工艺研究.绘制BL21 大肠杆菌在 3 种培养基中的生长曲线,优化T7噬菌体最佳接种时间以及最佳接种MOI.大量扩增T7噬菌体,通过超滤浓缩和PEG沉淀纯化噬菌体颗粒,再经Triton X-114变温萃取去除内毒素.结果显示,BL21在转接培养后2.5 h开始进入对数生长期,在对数后期以MOI=10-4接种T7 噬菌体,子代噬菌体产量可达到6.47×1010 PFU/mL.通过超滤浓缩可以有效浓缩T7噬菌体颗粒,同时去除约90%的内毒素,PEG沉淀可从浓缩液中回收约90%的噬菌体颗粒,且有效去除大部分宿主蛋白,但不能完全去除内毒.经3次Triton X-114变温萃取,最终收获的T7噬菌体产物中内毒素含量降至55 UE/mL.研究结果表明,通过优化T7噬菌体的培养条件可以实现高效扩增,联合使用超滤、PEG沉淀和Triton X-114 萃取等工艺能够制备高纯度T7噬菌体颗粒.