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斑节对虾cyclinH基因的原核表达和蛋白纯化

文献类型: 中文期刊

作者: 郭松 1 ; 傅明骏 2 ; 赵超 2 ; 江世贵 2 ; 杨其彬 2 ; 彭超 2 ; 李伟杰 2 ; 邱丽华 2 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院南海水产研究所

2.中国水产科学研究院南海水产研究所;上海海洋大学水产与生命学院;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室

关键词: 斑节对虾;细胞周期蛋白H;原核表达

期刊名称: 广东农业科学

ISSN: 1004-874X

年卷期: 2015 年 42 卷 03 期

页码: 125-130

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: cyclin H是细胞分裂周期调控中的重要因子,研究斑节对虾cyclin H对阐明斑节对虾卵巢发育机制有重要意义。构建了斑节对虾cyclin H的重组表达质粒p ET21a/cyclin H,利用原核表达技术进行诱导表达获得目的蛋白,并用亲和层析技术进行纯化,用SDS-PAGE、Western blot和质谱联用分析诱导和纯化结果。结果表明,斑节对虾cyclin H重组蛋白获得了表达,纯化的蛋白经鉴定为cyclin H重组蛋白;在22℃和37℃培养条件下,重组蛋白在LA和YTGA两种培养基上均能被诱导表达;22℃条件下,部分融合蛋白为可溶性表达;在37℃培养条件下LA培养基获得较好的效果,且均以包涵体形式存在。

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