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基于同源建模与分子对接技术构建抗Bt Cry1类毒素单链抗体定点饱和突变库

文献类型: 中文期刊

作者: 焦凌霞 1 ; 徐茜茜 2 ; 刘媛 2 ; 张霄 2 ; 刘贝贝 2 ; 梁颖 2 ; 刘贤金 2 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室

2.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室;河南科技学院食品学院

关键词: Cry1毒素;单链抗体;同源建模;分子对接;重叠延伸PCR;定点饱和突变

期刊名称: 现代食品科技

ISSN: 1673-9078

年卷期: 2016 年 03 期

页码: 12-17

收录情况: 北大核心

摘要: 转基因食品中苏云金芽胞杆菌(Bt)Cry毒素种类较多,对生态环境和食品安全等造成的潜在风险日益受到关注,制备针对多种Cry毒素的高效广谱抗体,进而建立广谱性快速检测方法,是对转Bt基因作物进行监管并确保生态环境和食品安全的基础。本研究利用基因工程抗体易于定向修饰及Cry毒素具有相似结构的特点,以实验室前期获得的人源化抗苏云金芽胞杆菌(Bt)Cry1Ac毒素单链抗体为材料,通过同源建模模拟单链抗体及五种Cry1类毒素的三维结构并利用分子对接技术分析单链抗体与Cry1类毒素结合的关键氨基酸位点;在此基础上利用重叠延伸PCR技术对关键氨基酸位点及其邻近位点进行定向改造,以构建定点饱和突变库,为筛选检测多种Cry1类毒素的广谱特异性抗体提供实验材料。

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