文献类型： 中文期刊

作者： 徐海 ¹ ; 王义伟 ² ; 鲍熹 ² ; 李鹏程 ² ; 郑其升 ² ; 侯继波 ² ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院

2.江苏省农业科学院,国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： GnRH;免疫去势;T7噬菌体;噬菌体疫苗

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2014 年 04 期

页码： 125-129

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 构建展示促性腺激素释放激素(GnRH)多肽的重组T7噬菌体,检测其对小鼠的免疫效果。人工合成GnRH多肽基因序列并用柔性Linker将其串联至3拷贝,然后克隆到T7 Select 415-1b噬菌体多克隆位点,构建重组噬菌体T7-3GnRH。经PCR鉴定并序列测定筛选阳性重组噬菌体,SDS-PAGE和Western-blot检测重组噬菌体表面GnRH多肽。重组噬菌体以每只1×1010PFU剂量免疫小鼠,免疫后不同时间段采血通过ELSIA检测血清中抗GnRH抗体,检测血清中睾酮含量,免疫后12周称体质量,剖检小鼠计算睾丸指数,进行睾丸的组织学观察。结果表明,成功构建了重组噬菌体T7-3GnRH,插入拷贝GnRH基因获得表面展示。噬菌体疫苗免疫后产生高水平抗GnRH抗体,其抗体发挥中和效应显著降低血清中睾酮含量。GnRH主动免疫抑制小鼠睾丸组织的发育,使睾丸萎缩,精子生成减少。获得了展示GnRH多肽的重组噬菌体,噬菌体疫苗免疫小鼠产生较高血清抗体并发挥良好的中和作用,为激素类小分子主动免疫做出有益探索。