文献类型： 中文期刊

作者： 陈丽 ¹ ; 欧阳凤秀 ² ; 钱炳俊 ³ ; 任宏 ² ; 王强 ⁴ ; 姜庆五 ² ; 王玉炯 ¹ ; 刘静波 ² ; 梁婉琪 ⁵ ; 潘爱虎 ⁵ ;

作者机构： 1.宁夏大学生命科学学院

2.复旦大学公共卫生学院

3.复旦大学生命科学学院

4.南京大学生命科学学院

5.上海市农业科学院农业生物技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室

关键词： 霍乱毒素B亚单位;胰岛素B链;融合基因CTB-INSB;原核表达;神经节苷脂GM1

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1003-3505

年卷期： 2005 年 21 卷 04 期

页码： 56-61

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 构建了霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit,CTB)与胰岛素(insulin)B链的融合基因 CTB-INSB,将该融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pETCIB;并将该 质粒转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后的表达产物经15％SDS-PAGE分 析表明可以表达融合蛋白,其分子量约为15.4kDa,且主要以包涵体形式存在,约占全菌蛋白的 30％。含CTB-INSB重组蛋白的包涵体经变性和复性后,可在体外自组装成五聚体结构。Western blotting分析结果显示CTB-INSB可分别被霍乱毒素的抗体和胰岛素的抗体识别,表明该蛋白具有 霍乱毒素B亚单位与胰岛素的双重抗原性。同时GM1-ELISA分析结果表明CTB-INSB在体外可 与神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)特异结合,进一步证实了它能够形成类似CTB五聚体的 高级结构,具有生物活性。