文献类型： 中文期刊

作者： 胡钰婷 ¹ ; 张殿昌 ² ; 崔淑歌 ² ; 郭华阳 ¹ ; 陈明强 ² ; 江世贵 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院南海水产研究所

关键词： 合浦珠母贝;C-型凝集素基因;RT-PCR;原核表达

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2011 年 35 卷 09 期

页码： 50-59

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过EST筛选结合重测序法获得合浦珠母贝一种C-型凝集素cDNA的全长序列(命名为PoLEC1)。PoLEC1全长988 bp,5'-UTR为33 bp,3'-UTR为101 bp,开放阅读框为864 bp,编码287个氨基酸,分子量为31.68 ku,理论等电点约5.83。预测的氨基酸序列中含有信号肽(Met1-Ser19)和糖结合位点。同源性分析结果表明,PoLEC1与其它物种C-型凝集素的的糖识别结构域序列的同源性在18.8%～28.6%,相似性在28.9%～50.0%之间。进化树分析结果表明,PoLEC1与栉孔扇贝聚为一支。组织表达分析表明,PoLEC1 mRNA在消化腺、外套膜、性腺、闭壳肌、肠、鳃和血淋巴组织均有表达,在消化腺中的表达分析表明,经溶藻弧菌刺激后2 h表达显著下调,而在4和24 h后表达显著上调。利用PoLEC1成熟肽构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行重组表达。制备包涵体后,用IDA HisBind树脂纯化得到单一的重组蛋白,凝菌试验表明该蛋白对大肠杆菌有明显的凝集作用。